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技術(shù)文獻

本生甘油三酯(TG)檢測試劑盒 2022已更新(每日/實時)
閱讀次數(shù):15335 發(fā)布時間:2022/12/5 13:20:15
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本生甘油三酯(TG)檢測試劑盒 2022已更新(每日/實時)

PS1087 甘油三酯(TG)檢測試劑盒 GPO-PAD單試劑微板法 (psaitong)
保存條件:
-20℃ 避光 6個月
 
產(chǎn)品簡介
甘油三酯(Triglyceride,TG)又稱三酰甘油,是3分子長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人體內(nèi)含量多的脂類,大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量,同時肝臟、脂肪等組織還可以進行甘油三酯的合成,用酶學方法測定 TG 是生化檢測中的常用方法, 其特點是:1、靈敏度、準確度、精密度均高;2、使用溫和的反應(yīng)條件;3、操作簡便;4、適用于自動分析儀。
本公司甘油三脂(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP 單試劑微板法)又稱磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等,其原理是甘油三脂被 LPL 水解為甘油和脂肪酸,后者經(jīng)甘油激酶和 ATP 磷酸化,G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過氧化氫,再經(jīng)過氧化物酶(POD)催化,使 4-氨基安替比林與酚(三者合稱 PAP)反應(yīng),生成紅色benhun醌亞胺(Trinder 反應(yīng)),酶標儀在 500~520nm 處進行比色測定,用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的甘油三脂含量定量測定。該試劑盒僅用于科研域,不適用于臨床診斷或其他用途。
 組分:
名稱 規(guī)格 儲存
試劑(A): GPO-PAP工作液 Good's Buffer  
 
30mL
 
 
-20℃ 避光
LPL、GK、GPO
過氧化物酶(POD)
4-氨基安替比林
對氯酚
試劑(B): Glycerol 標準(1.7mmol/L) 1mL 4℃ 避光
試劑(C): ddH2O 1mL RT
 
自備材料:
1、生理鹽水或PBS。
2、96 孔板或離心管、小試管。
3、水浴鍋或恒溫箱。
4、酶標儀或分光光度計。
5、全自動或半自動生化分析儀。
 
操作步驟(僅供參考)
一、樣本處理
1、血清、血漿、腦脊液樣本:從待測樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測,如超過線性范圍,用生理鹽水稀釋后檢測。
2、細胞樣本
a:取適量的細胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
b:.用 PBS 或生理鹽水清洗 1-2 次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
c:加入200-300μl 的PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細胞,功率300W,每次3-5s,間隔30s,重復3-5次;亦可手動勻漿,制備好的勻漿液不可離心;亦可用1-2% Triton X-100 冰浴 30-60min,制備好的裂解液不可離心。
3、組織樣本:準確稱取適量組織樣本,按質(zhì)量(g):生理鹽水或PBS(mL)=1:9的比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴條件下手動或機械勻漿,2500-3000g 離心10min,取上清待用。
二、酶標儀TG測定操作:
1:按下表依次加入試劑:
加入物(μL) 空白孔 標準孔 待測孔
ddH2O 3 - -
Glycerol 標準(1.7mmol/L) - 3 -
待測樣本 - - 3
GPO-PAP 工作液 300 300 300
2:充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3:酶標儀測定 500-520nm 吸光度,以空白孔調(diào)零,讀取標準孔和各待測孔的吸光度。
三、分光光度計(1ml 比色杯)、半自動生化分析儀 TG 測定操作:
1、按下表依次加入試劑:
加入物(mL) 空白管 標準管 待測管
ddH2O 0.01 - -
Glycerol 標準(1.7mmol/L) - 0.01 -
待測樣本 - - 0.01
GPO-PAP 工作液 1 1 1
2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度計測定500-520nm吸光度,空白管調(diào)零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
四、普通分光光度計(2mL比色杯)TG 測定操作:
1、按下表依次加入試劑:
加入物(mL) 空白管 標準管 待測管
ddH2O 0.02 - -
Glycerol 標準(1.7mmol/L) - 0.02 -
待測樣本 - - 0.02
GPO-PAP 工作液 2 2 2
2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度計測定500-520nm吸光度,空白管調(diào)零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
五、全自動生化分析儀 TG 測定操作:
1、按下表依次加入試劑:
加入物((μL) 空白管 標準管 待測管
ddH2O 3 - -
Glycerol 標準(1.7mmol/L) - 3 -
待測樣本 - - 3
GPO-PAP 工作液 300 300 300
2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
3、全自動生化分析儀測定 500-520nm 波長處吸光度,以空白管調(diào)零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
 
機器參數(shù):
主波長/次波長 500/600nm
反應(yīng)類型 終點法
反應(yīng)方向 升反應(yīng)(+)
 
計算公式:
血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零):
TG(mmol/L)={(待測管吸光度-空白吸光度)/(標準管吸光度-空白吸光度)}×1.7mmol/L
血清、血漿等液體樣本(全自動生化分析儀):
TGmmol/L)=(待測管吸光度/(標準管吸光度)×1.7mmol/L
細胞、組織等樣本(空白調(diào)零):
TG(mmol/L)={ ( 待 測 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 標 準 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) }×1.7mmol/L÷待測樣本濃度(mg/mL)
細胞、組織等樣本(全自動生化分析儀):
TG(mmol/L)=(待測管吸光度/(標準管吸光度)×1.7mmol/L÷待測樣本濃度(mg/mL)
 
參考區(qū)間:
健康成年人:
理想范圍:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
邊緣升高:<1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
升高:<2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
很高:≥565mmol/L(500mg/dl)
 
性能指標:
外觀 無色至淡黃色澄清液體
線性范圍 0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2>0.98
靈敏度 檢測下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
變異系數(shù) 批內(nèi)<5%,批間<8%,總誤差<10%
空白吸光值 <0.2(1cm 光徑)
干擾因素 膽紅素<205μmol/L;血紅蛋白<6g/L;EDTA、肝素抗凝時,對結(jié)果無明顯影響。
穩(wěn)定性 密閉,6個月
 
注意事項:
1、上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。
2、本法可直接用于檢測腦脊液中的TG含量,但不能直接檢測尿液中的TG含量,因為未經(jīng)處理的尿液中含有還原性物質(zhì),影響過氧化物酶反應(yīng)。
3、待測樣本如不能及時測定,應(yīng)置于2-8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
4、本法線性范圍可達9.0mmol/L,如果樣本TG濃度過高,結(jié)果可能呈假性降低,應(yīng)用生理鹽水稀釋后重測,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
 
 
有效期: -20℃ 避光, 6個月有效。

原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司

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