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大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
閱讀次數(shù):15341 發(fā)布時間:2022/12/15 10:07:03
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  大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

  大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa測定試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被大鼠Ⅱ型膠原(COL2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠Ⅱ型膠原(COL2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

  大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa測定試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢

  1、優(yōu)點(diǎn)明顯 眾所周知產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)決定的產(chǎn)品好壞,我司產(chǎn)品具有穩(wěn)定的重復(fù)性,吸附性能好,空白值低,并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測,方法簡單,操作方便,限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

  2、品質(zhì)保障 產(chǎn)品質(zhì)量,出庫質(zhì)檢把控嚴(yán)格,保障提供給客戶的100%是產(chǎn)品,運(yùn)輸全程跟蹤,公司有任何質(zhì)量問題包退換,誠信經(jīng)營,合作共贏。我們提供實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材一站式供應(yīng)服務(wù),超低價,高品質(zhì),進(jìn)口品牌全線代理,優(yōu)勢的渠道,我們只做行貨,不用擔(dān)心質(zhì)量問題。售后技術(shù)支持到底!

  3、業(yè)定制 應(yīng)市場需求公司特推出業(yè)定制酶聯(lián)免疫分析試劑盒服務(wù),全程有業(yè)的技術(shù)老師跟蹤并和客戶保持溝通,直到定制成功為止。

  4、免費(fèi)代測 公司訂購酶聯(lián)免疫分析試劑盒,享全程技術(shù)指導(dǎo)并可免費(fèi)代測,為您分憂。全程有業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)代測,收到樣本一般7個工作日出結(jié)果。

  5、服務(wù)周到 設(shè)立售后服務(wù)中心,24小時及時響應(yīng),真正做到后顧無憂,不斷完善服務(wù)體系。

  大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒標(biāo)本要求

  1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

  2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

  3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

  4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

  6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能人上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

  7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒操作流程

  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

  3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

  4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

  大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒注意事項(xiàng)

  1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

  2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

  3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  5.底物請避光保存。

  6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

  7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  8.本試劑不同批號組分不得混用。

  10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

  elisa試劑盒 我司由具有行業(yè)背景和豐富市場經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成,于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品,為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī);a(chǎn)各個階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司

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