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技術(shù)文獻(xiàn)

為什么加樣時要避免出現(xiàn)氣泡呢?
閱讀次數(shù):16243 發(fā)布時間:2020/4/30 10:38:36
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通常氣泡是聚集在elisa試劑盒酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。很多說明書也都提到,加樣時要避免出現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢?產(chǎn)生的氣泡是不是會影響實驗結(jié)果呢?該如何避免呢?下面就和本生生物小編一起來了解一下吧!

  1、包被時有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不完全實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。

  2、封閉時有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性。

  3、加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。

  4、加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性)。

  5、加顯色液時有氣泡的話---顯色不完全。

  6、加終止液時有氣泡的話(1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)

  7、洗滌時有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能完全洗去,做無用功。

  避免方法:

  1、加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。

  2、封閉時一定要加滿孔,

  3、洗滌時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來驅(qū)除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。

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