新生牛血清樣品采集方法及應用范圍_技術文章_本生（天津）健康科技有限公司

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新生牛血清樣品采集方法及應用范圍
閱讀次數(shù)：15988 發(fā)布時間：2020/6/12 15:43:27

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新生牛血清樣品采集方法及應用范圍

新生牛血清一般主要分為特級新生牛血清，優(yōu)級新生血清，標準新生牛血清，其操作手法上又分為無菌采制，輻照滅菌，無菌過濾等，作為實驗室試劑品;其規(guī)格上都是以"ml"為單位，常見規(guī)格有100ml、200ml、500ml，其主要作用是用于生化研究上，和培養(yǎng)基混合組成完全培養(yǎng)基，其采集方法主要分為以下步驟!

新生牛血清樣品采集方法

1、采集樣品前的準備事項

A、器具

a、器具的準備

保溫箱或保溫瓶，酒精棉，碘酒棉，棉簽、注射器及針頭(7×38，9×38,12×38，20×38等)。

b、輔助器材的準備

保溫箱、離心管、試管架、記號筆、自封袋，膠布、封口膜、封條、冰(暖)袋等。

B、防護安全用品

在給新生牛血清采集時，我們會要求采集者都應該注意防護安全，需要準備好口罩、乳膠手套、防護服、防護帽、膠靴等。

2、采集樣品進行時

A、操作步驟

a、由于新生牛屬比較小型體，所以我們只需將其穩(wěn)定，使其頭部稍前伸并稍偏向?qū)?cè)。

b、對頸靜脈局部進行剪毛、消毒，在這過程中，我們要安撫新生牛的情緒，以免新生牛出現(xiàn)不適而亂動。

c、看清頸靜脈后，采血者用左手拇指(或食指與中指)在采血部位稍下方(近心端)壓迫靜脈血管，使之充盈、怒張。

d、右手持采血針頭，沿頸靜脈溝與皮膚呈45°角，迅速刺入皮膚及血管內(nèi)，如見回血，即證明已刺入;使針頭后端靠血管內(nèi)，如見回血，即證明已刺入;使針頭后端靠近皮膚，以減小其間的角度，近似平行地將針頭再伸入血管內(nèi)1～2厘米。

e、放開壓迫脈管的左手，收集血液。采完后，以干棉球壓迫局部并拔出針頭，再以5%碘酊進行局部消毒。

B、注意事項

a、采血完畢，做好止血工作，即用干棉球壓迫采血部位止血，防止血流過多。

b、牛的皮膚較厚，頸靜脈采血刺入時應用力并瞬時刺入，見有血液流出后，將針頭送入采血管中，即可流出血液。

3、采集樣品成功后的保存及編號填寫

a、待樣品采集完畢后，我們應該要對其進行血樣編號填寫及保存，血樣采集后應立即進行編號，編號注意與被采畜禽一一對應。

b、編號規(guī)則：注明采集地區(qū)、養(yǎng)殖場名稱、動物種類(如采樣較多，可以一個養(yǎng)殖場一個自封袋，在自封袋上注明信息，在離心管上注明編號)。

c、保存方法：一般選用塑料泡沫箱存放血液或血清。采血后針頭向上扎進箱壁或放入離心管中存放;箱內(nèi)放入冰塊或暖水袋，保證箱內(nèi)20-25℃的室溫水平保存2小時以上即可析出血清;如果能在24小時內(nèi)及時送樣可2-8℃冷藏保存，若不能及時送樣化驗需冷凍保存。

新生牛血清的應用范圍

1、在說到新生牛血清的應用范圍前，我們需要先了解一下培養(yǎng)基與新生牛之間的關系，細胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中*重要的成分，由培養(yǎng)基和新生牛血清混合組成的完全培養(yǎng)基能夠提供細胞生長所必需的營養(yǎng)素、生長因子和激素，并能調(diào)節(jié)培養(yǎng)體系的 pH 值和滲透壓。

2、目前主要有兩種基本的細胞培養(yǎng)體系，一種是使細胞在人工基質(zhì)上單層生長，即貼壁培養(yǎng)、微載體、片狀載體等培養(yǎng)方式)，另一種是使細胞在培養(yǎng)基中自由漂浮生長即懸浮培養(yǎng)，其中包括全懸浮培養(yǎng)和需要借助載體的培養(yǎng)。

3、除造血細胞系和其他一些細胞外，大多數(shù)脊椎動物細胞均具有貼壁依賴性，必須在合適的基質(zhì)上培養(yǎng)，且該基質(zhì)必須經(jīng)過特殊處理，以便細胞粘附和伸展 (即組織培養(yǎng)處理)。但是，許多細胞系也可采用懸浮培養(yǎng)。

4、由于新生牛血清在兩種培養(yǎng)體系中發(fā)揮的作用有所區(qū)別，如貼壁培養(yǎng)血清主要提供貼壁因子和營養(yǎng)物質(zhì)，而懸浮培養(yǎng)則主要提供促細胞生長的因子;其主要的應用范圍一般來說，主要有以下這些!

5、新生牛血清在動物細胞懸浮培養(yǎng)的應用中依據(jù)細胞是否具有貼壁依賴性，分為動物細胞全懸浮細胞培養(yǎng)和動物細胞微載體懸浮培養(yǎng);全懸浮細胞(如BHK21懸浮細胞株)可以在生物反應器中直接進行生產(chǎn)增殖，具有細胞自由生長、培養(yǎng)環(huán)境均一、取樣簡單、培養(yǎng)操作簡單可控、放大方便、污染率和成本低的特點。

6、貼壁細胞(ST、Vero細胞等)在生物反應器中懸浮培養(yǎng)時需要借助介質(zhì)表面，通常是微載體，其細胞所能達到的濃度和生產(chǎn)產(chǎn)品的產(chǎn)量依賴于微載體提供的生長表面積;微載體為動物細胞生長提供了便利的表面，具有極大的培養(yǎng)表面積/體積比，它能夠?qū)崿F(xiàn)細胞高密度培養(yǎng)，是目前貼壁動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)使用的主要介質(zhì)。

7、在懸浮培養(yǎng)中，生產(chǎn)抗體藥物的CHO細胞、生產(chǎn)流感(禽流感)疫苗的MDCK細胞等已經(jīng)采用無血清培養(yǎng);但在BHK21細胞全懸浮培養(yǎng)的口蹄疫疫苗生產(chǎn)中，牛血清仍然被廣泛使用。

8、在南美和印度，口蹄疫疫苗生產(chǎn)通常添加10%左右成牛血清，而國內(nèi)企業(yè)采用低血清培養(yǎng)基彌補了基礎細胞培養(yǎng)基的不足;但是，牛血清中的一些促細胞生長的成分還是無法被替代，通常會在培養(yǎng)基中添加1%-3%的牛血清，同時它還起著調(diào)節(jié)培養(yǎng)液酸堿度的作用。

9、為使培養(yǎng)體系保持良好的混合狀態(tài)和分散性，從而提高細胞生長量，需對培養(yǎng)體系進行攪拌，這時培養(yǎng)基中的牛血清即可以降低細胞的機械損傷;總而言之，牛血清因有著細胞生長必須的營養(yǎng)成份，所以具有極為重要的功能。

10、主要用于原代細胞培養(yǎng)、傳代細胞培養(yǎng)及病毒疫苗的研制和生產(chǎn);對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司