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　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析

　　1、要移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%。可用水和天平">電子天平進(jìn)行校正。校正方法自己放狗吧，但有業(yè)人員進(jìn)行矯正。

　　2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支(靠，基本是廢話了)。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)(應(yīng)該是特別是!)。

　　3、要在實(shí)驗(yàn)1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定(這個(gè)是容易忽視的!)。

　　4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。

　　5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

　　6、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

　　7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去(應(yīng)該是加樣的時(shí)候，板上稀釋不算的吧)。

　　8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能(注意是平行晃動(dòng)，即上下or左右)。

　　9、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)(老辦法是放入濕盒內(nèi)，紗布加點(diǎn)無菌水即可)。

　　10、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干(報(bào)紙就免了吧!)。

　　11、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可保存(洗液先用現(xiàn)配不費(fèi)多少事的)。

　　12、底物是光敏感的，要在臨用現(xiàn)配(同，避光!)。

　　13、檢測(cè)，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

　　14、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸(終止液為硫酸，小心毀容)。

　　15、待檢樣品要澄清，否則會(huì)影響結(jié)果。

　　16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

　　17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

　　18、對(duì)結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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