本生闡述：什么是牛血清白蛋白?2023資料已更新_技術(shù)文章

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本生闡述：什么是牛血清白蛋白?2023資料已更新
閱讀次數(shù)：15334 發(fā)布時(shí)間：2023/5/16 10:25:44

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　　本生闡述：什么是牛血清白蛋白?

　　牛血清白蛋白(BSA)是牛血清中的一種球蛋白，包含607個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點(diǎn)為4.7。

　　應(yīng)用：牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA，通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性減輕不利環(huán)境因素，如加熱、表面張力及化學(xué)因素引起的變性。

　　測(cè)定蛋白濃度按50：1配置BCA工作液。 10ulC液(蛋白標(biāo)準(zhǔn))+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標(biāo)準(zhǔn)液加入96孔板的第1~8標(biāo)準(zhǔn)孔中，在其他樣品孔中加入10ul待測(cè)樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液，室溫放置2小時(shí)。用酶標(biāo)儀測(cè)定蛋白濃度：測(cè)定A562，依標(biāo)準(zhǔn)曲線算出蛋白濃度。

　　SDS-PAGE電泳

　　1、制膠：按比例配制分離膠，緩緩地?fù)u動(dòng)溶液，使激活劑混合均勻，將凝膠溶液平緩地注入兩層玻璃中，再在液面上小心注入一層水，以阻止氧氣進(jìn)入凝膠溶液中，靜置40min。同按比例配制濃縮膠，但混勻溶液時(shí)不要過(guò)于劇烈以免引入過(guò)多地氧氣。吸去不連續(xù)系統(tǒng)中下層分離膠上的水分，連續(xù)平穩(wěn)的注入凝膠溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齒尖留有氣泡，靜制60min以上以聚合。

　　2、預(yù)電泳：將聚合好的凝膠安置于電泳槽中，小心拔去梳子，加入電泳緩沖液后低電壓10-20V的預(yù)電泳20-30min。 (目的是清除凝膠內(nèi)的雜質(zhì)，疏通凝膠孔徑以電泳過(guò)程中電泳的暢通)。

　　3、樣品準(zhǔn)備：先計(jì)算上樣體積，然后按樣品上樣buffer=4：1的比例加入上樣bufer混勻，沸水10分鐘，冰上5分鐘。

　　4、加樣：預(yù)電泳后依次加入標(biāo)準(zhǔn)品(Marker)和待分析樣品。 (加樣時(shí)間要盡量短，以免樣品擴(kuò)散，可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液避免邊緣效應(yīng)。每個(gè)泳道加5ul 。)

　　5、電泳：加樣完畢，選擇80V恒壓進(jìn)行電泳，電泳直至溴酚藍(lán)染料沿到達(dá)兩膠交界處(一般約20分鐘)，更換至100V恒壓電泳，電泳直至溴酚藍(lán)染料沿下至凝膠末端處，即停止電泳(一般約為1小時(shí)20分鐘)。

　　牛血清白蛋白 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司