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技術文獻

大鼠CD3分子(CD3)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
閱讀次數(shù):15673 發(fā)布時間:2020/12/10 13:55:01
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大鼠CD3分子(CD3)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
2 IU/ml-48 IU/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠相關液體樣本中CD3 分子(CD3)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠CD3 分子(CD3)水平。用純化的大鼠CD3
分子(CD3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入CD3 分子(CD3),
再與HRP 標記的CD3 分子(CD3)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底
洗滌后加底物。顏色的深淺和樣中的CD3 分子(CD3)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下
測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣中大鼠CD3 分子(CD3)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準(96IU/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠CD3分子(CD3)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
操作步驟
1. 標準的稀釋:本試劑盒提供原倍標準支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
48 IU/ml 5 號標準 150μl 的原倍標準加入150μl 標準稀釋液
24 IU/ml 4 號標準 150μl 的5 號標準加入150μl 標準稀釋液
12 IU/ml 3 號標準 150μl 的4 號標準加入150μl 標準稀釋液
6 IU/ml 2 號標準 150μl 的3 號標準加入150μl 標準稀釋液
3 IU/ml 1 號標準 150μl 的2 號標準加入150μl 標準稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣孔。在酶標包被板上標準準確加樣50μl,待測樣孔中先加樣稀釋液40μl,
然后再加待測樣10μl(樣zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。

大鼠CD3分子(CD3)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
操作程序總結:
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣的OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣的OD 值代入方程式,計算出樣濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。次加樣時間控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準孔*孔的OD 值),請先用樣稀釋液稀釋定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月

原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司

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