技術(shù)文獻(xiàn)
血清中常遇三大問題是?
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。
天津本生將具體講解血清中常遇到三大問題。
1、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長時(shí)間儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請勿超過*個(gè)月。若*次無法用完*瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2、血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另*個(gè)無菌瓶里(*般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃氯麨V膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。
3、實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?
*內(nèi)*致認(rèn)為HYCLONE的血清是zui好的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,*外*般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴,*般不是太嬌氣的細(xì)胞,*產(chǎn)的就夠用了。此外,由于*內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的可能性也很大。所以,我*般會從直銷員那里買血清,有的*外生物公司由于剛剛進(jìn)入中*,知名度不高,但是其實(shí)在*外已經(jīng)做得很不錯(cuò)了,如Wisent等,他們在*內(nèi)有辦事處,我會從那里拿,血清的品質(zhì)和HYCLONE不相上下,但價(jià)格相對優(yōu)惠很多。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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