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細(xì)胞爬片的固定的方法有哪些
閱讀次數(shù)：15553 發(fā)布時間：2021/10/9 10:17:03

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　　細(xì)胞爬片的固定的方法有哪些

　　一、將蓋玻片從24孔板中取出后，用PBS沖洗3次，再放入丙酮中固定5分鐘，室溫下涼干即可將其貼在載玻片上，-80度保存?zhèn)溆?注意，丙酮很容易揮發(fā)，為節(jié)約資源，在密閉容器中固定!

　　二、

　　1.免疫組化的爬片是用冷丙酮固定15-20分，室溫涼干后，-20度保存或直接做。

　　2.TUNEL和DAPI染色，均用4%的多聚甲醛固定20-30分鐘。我做TUNEL時還用冷甲醇固定過，因為多聚甲醛可以自發(fā)熒光，為了避免假陽性。

　　三、

　　1 免疫組化的爬片是用PBS沖洗3次，冷丙酮固定，這個大家都差不多，偶也做過。

　　2 我們這里也用4度甲醇：丙酮1：1的比例，固定十分鐘，效果很好，我屢試不爽哦。

　　3 對于抗原表達(dá)在細(xì)胞膜的爬片，用溫和一點(diǎn)的固定劑，如：多聚甲醛，效果更好一些!對于貼壁不牢的片子，用丙酮固定，多聚甲醛有時會在固定時細(xì)胞整片漂起。要是不用蓋玻片直接在六孔板里做的話，用丙酮很容易花板，這一點(diǎn)也要注意。

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原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司