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天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧
閱讀次數(shù):15603 發(fā)布時間:2021/10/9 10:20:18
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  天津本生-全黑全白96孔板鋪板技巧

  剛開始用96孔板種細胞 時細胞總是分布不均勻,第二天就會發(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長,而還有不少地方細胞則很稀疏,細胞密集的地方因細胞與細胞之間的接觸抑制影響細胞的生長,這樣就很難評價干預(yù)因素對細胞的作用,因此將96孔板種均勻也是進行后續(xù)實驗的提,現(xiàn)將天津本生小編以用的舊法和用的新法比較一下,以讓大家看看各自優(yōu)缺。

  1、舊法:種過板子后,用手將96孔板平拿起,左右晃動幾下,然后再后晃動幾下,不過這種方法5個復(fù)孔中總有2-3個孔中細胞分布不均勻,多數(shù)情況下是孔的中間出現(xiàn)成堆分布,為此苦惱了一陣子。還又一次見一師姐將種好的板子放在搖床上搖了幾分鐘,結(jié)果更慘了,細胞全部跑到中間了。

  一般96孔板我每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細胞懸液混一下再,繼續(xù)加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng) 箱。

  2、新法:這種方法簡直是太好了,種的很均勻。先用移液槍將吹打均勻的細胞吸起來,讓后將槍頭緊貼著孔的一側(cè)壁(注意槍頭的尖不要接觸孔底),然后將槍頭中的細胞緩緩的打下去,種好之后千萬不要搖晃板子,直接放到顯微鏡 下看就可以了,此方法可以說是100%的有效吧。 希望對大家有幫助。

  補充:從6孔板到96空板要細胞分散均勻,先用培養(yǎng)基把細胞稀釋好,再把培養(yǎng)板放在適當(dāng)?shù)奈恢,加入細胞時和加入細胞后不移動培養(yǎng)板;如果空中有的地方?jīng)]有培養(yǎng)基可吹打,但不要移動培養(yǎng)板,加入細胞后靜置20-30分鐘再移入培養(yǎng)箱。這樣細胞一般都能長的很均勻。當(dāng)然,提是細胞消化的很好。

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