技術(shù)文獻(xiàn)
干貨分享:ELISA實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1、固相載體選擇
聚苯乙/烯:具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或抗原吸附其上后仍保留原來(lái)的免疫學(xué)活性。
聚氯乙/烯:聚氯乙/烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙/烯高,但空白值也略高。
良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間性能相近。
2、包被
①板孔的選擇:ELISA別的微孔板。
、诳贵w選擇:選擇支持ELISA實(shí)驗(yàn)的抗體,根據(jù)推薦濃度稀釋或摸索適濃度。
③包被緩沖液:pH9.6碳酸鹽緩沖液或pH7.2磷酸鹽緩沖液。
④包被溫度:2-8 ℃過(guò)夜包被或室溫(37℃)包被2h。
、莅粷舛龋喊粷舛入S載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化。一般包被濃度為10ug/ml-20ug/ml。
3、封閉
、侔恢笠欢ㄒ⒓捶忾](封閉非特異性抗體)。
、谶x擇效果較好的封閉劑(細(xì)胞培養(yǎng)BSA、Tween等)。
4、加樣及孵育
、偌訕訒r(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
、诜跤臅r(shí)間及溫度參考試劑盒說(shuō)明書(shū)。如有條件,建議加樣孵育時(shí)使用shaker震蕩儀,推薦軌道直徑3mm,轉(zhuǎn)速在500±50rpm。
、蹤z測(cè)抗體、酶標(biāo)物的稀釋比例、孵育溫度、孵育時(shí)間嚴(yán)格根據(jù)說(shuō)明書(shū)提示。
、芟窗鍖(duì)于ELISA來(lái)說(shuō),是其關(guān)鍵的一步,ELISA的特異性。
、莘獍迥ひ欢ㄒ淮我粨Q,切勿二次甚至多次使用,以防交叉污染。
5、顯色和終止
、偈褂眯铏z查,底物在加入96孔板之應(yīng)為無(wú)色透明。
、陲@色底物需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免污染。
、鄯跤龝r(shí)間,說(shuō)明書(shū)上為參考范圍,但具體需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件自行摸索。
ELISA 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
相關(guān)產(chǎn)品
相關(guān)推薦產(chǎn)品
請(qǐng)輸入要搜索的關(guān)鍵詞
本生(天津)健康科技有限公司:無(wú)菌盒裝吸頭寬口,ABI7500用八聯(lián)管,方形培養(yǎng)基瓶,SBS三碼合一冷凍管,0.1mlPCR單管,0.1mlPCR八連管,300ul無(wú)菌盒裝吸頭,4%組織細(xì)胞固定液,熒光定量PCR光學(xué)平蓋,無(wú)裙邊96孔PCR板,Roche480專用PCR96孔板,熒光定量PCR專用光學(xué)封板膜,Roche480專用輔助器,大鼠白介素6ELISA試劑盒,15ml尖底自立離心管,2.0ml帶鎖扣離心管,50ml細(xì)胞培養(yǎng)瓶,無(wú)菌盒裝吸頭寬口,羊抗小鼠IgG-HRP,沃森200ul吸頭,一次性移液管,1000ul帶濾芯吸頭,一次性塑料培養(yǎng)皿,96孔深孔板,迪夫快速染色液,96孔可拆酶標(biāo)板,2.0ml帶鎖扣離心管,特級(jí)胎牛血清,人雙鏈RNA試劑盒,愛(ài)思進(jìn)0.2ml八連管PCR管
地址:天津市武清區(qū)汽車產(chǎn)業(yè)園 電話:18502669006 傳真: 技術(shù)支持:阿儀網(wǎng) 總訪問(wèn)量:1411740