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　　豬免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒洗滌方法

　　1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60。洗板5次。

　　2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

　　實驗開始，各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

　　1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

　　2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用15分鐘內(nèi)配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。

　　3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

　　4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

　　5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

　　6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。

　　7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

　　8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。

　　9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

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原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司