技術(shù)文獻(xiàn)
elisa出現(xiàn)全板空白的原因
ELISA實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)全板空白的原因主要包括以下幾個(gè)方面:
試劑問(wèn)題:試劑盒在運(yùn)輸、保存期間放置的溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)長(zhǎng),導(dǎo)致抗原、抗體效價(jià)下降,酶的活力降低;試劑盒已經(jīng)超出保存的有效期,抗原抗體效價(jià)下降,酶的活性降低。
操作問(wèn)題:漏加或者誤加試劑,如忘記加酶、忘記加顯色液、酶或顯色液污染失效等。
樣本問(wèn)題:樣本存在內(nèi)源性干擾物質(zhì),樣本溶血、貯存過(guò)久、凝集不全、被細(xì)菌污染等。
設(shè)備問(wèn)題:洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物;洗滌液配制有誤等。具體原因分析:
試劑問(wèn)題:試劑盒在運(yùn)輸、保存期間放置的溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)長(zhǎng),導(dǎo)致抗原、抗體效價(jià)下降,酶的活力降低;試劑盒已經(jīng)超出保存的有效期,抗原抗體效價(jià)下降,酶的活性降低。
操作問(wèn)題:漏加或者誤加試劑,如忘記加酶、忘記加顯色液、酶或顯色液污染失效等。
樣本問(wèn)題:樣本存在內(nèi)源性干擾物質(zhì),樣本溶血、貯存過(guò)久、凝集不全、被細(xì)菌污染等。設(shè)備問(wèn)題:洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物;洗滌液配制有誤等。
解決方法:
檢查試劑:確保試劑在有效期內(nèi)使用,避免高溫存放;檢查試劑是否有過(guò)期或失效的情況。13規(guī)范操作:嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行,避免漏加或誤加試劑;每次加液核對(duì)標(biāo)簽,確保無(wú)誤。
處理樣本:避免樣本溶血、污染、過(guò)久儲(chǔ)存等現(xiàn)象;檢查樣本中是否存在內(nèi)源性干擾物質(zhì)。
設(shè)備檢查:使用干凈的器皿配制試劑,確保洗滌液正確配制;校正溫育箱溫度,確保溫育時(shí)間和溫度足夠。
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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