人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒使用說(shuō)明_技術(shù)文章

技術(shù)文獻(xiàn)

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒使用說(shuō)明
閱讀次數(shù)：16 發(fā)布時(shí)間：2024/11/11 9:08:30

分享到：

　　人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒使用說(shuō)明

　　‌試劑準(zhǔn)備與樣品收集‌：

　　‌血清‌：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，避免細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘分離血清和紅細(xì)胞。

　　‌血漿‌：使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

　　‌細(xì)胞上清液‌：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　‌組織勻漿‌：將組織加入適量生理鹽水搗碎，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

　　‌保存‌：樣本收集后應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，否則按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融‌。

　　‌試劑盒保存與處理‌：

　　‌試劑盒保存‌：試劑盒應(yīng)保存在2-8℃(頻繁使用時(shí))或-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))。

　　‌洗滌液處理‌：濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶‌。

　　‌實(shí)驗(yàn)步驟‌：

　　‌標(biāo)準(zhǔn)品配制‌：使用加入0.5ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，管加標(biāo)本稀釋液900ul，其余各管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul移至第二管，如此反復(fù)對(duì)倍稀釋，第八管為空白對(duì)照‌。

　　‌標(biāo)本激活‌：將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進(jìn)口聚丙烯管中，再加10ul血清或血漿標(biāo)本，加20ul 1N HCI，蓋緊，上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘‌。

　　‌ELISA檢測(cè)‌：采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TGF-α呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度‌。

　　‌注意事項(xiàng)‌：

　　‌試劑盒保存‌：試劑盒應(yīng)保存在2-8℃或-20℃，使用室溫平衡20分鐘。

　　‌洗滌液處理‌：從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

　　‌實(shí)驗(yàn)操作‌：嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，所有液體組分使用充分搖勻。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封保存。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下‌。

　　通過(guò)以上步驟，可以方便、快速和準(zhǔn)確地測(cè)定TGF-α的濃度，為相關(guān)疾病的診斷和治療提供參考依據(jù)‌。

　　本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司