技術文獻
人類重組ph20(spam1)ELISA試劑盒實驗原理
人類重組ph20(spam1)ELISA試劑盒實驗原理是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學檢測方法，常用于檢測血清、血漿及相關液體樣本中人類重組ph20(spam1)的含量。ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)，自20世紀60-70年代問世以來，因其操作簡便、高通量、靈敏度和特異性高等優(yōu)點，在生物醫(yī)學研究域得到了廣泛的應用。本文將詳細闡述人類重組ph20(spam1)ELISA試劑盒的實驗原理及操作步驟。
實驗原理
ELISA的基本原理是將抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后加入酶標二抗，通過底物顯色反應，根據(jù)顏色變化來檢測抗原-抗體反應的存在。在人類重組ph20(spam1)ELISA試劑盒中，這一過程被具體化為以下幾個步驟：
1. 包被：將純化的類重組ph20(spam1)抗體包被在微孔板表面，制成固相抗體。這一步是實驗的基礎，抗體與微孔板表面的結(jié)合能力直接影響到后續(xù)步驟的特異性和靈敏度。
2. 加樣：向包被有抗體的微孔中加入待測樣本和標準品。待測樣本中的類重組ph20(spam1)會與固相抗體結(jié)合，形成抗原-抗體復合物。標準品則用于繪制標準曲線，以便后續(xù)計算待測樣本中類重組ph20(spam1)的濃度。
3. 加酶標抗體：加入HRP(辣根過氧化物酶)標記的類重組ph20(spam1)抗體。這些酶標抗體會特異性地識別并結(jié)合到抗原-抗體復合物上，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。
4. 洗滌：通過洗滌去除未結(jié)合的抗原、抗體和酶標抗體，減少背景信號的干擾，提高實驗的準確性。
5. 加底物顯色：加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺)。在HRP的催化下，TMB會被氧化成藍色產(chǎn)物，隨后在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色產(chǎn)物。顏色的深淺與樣本中類重組ph20(spam1)的含量成正比。
6. 終止反應：加入終止液，使酶失活，停止顯色反應。
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原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司
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