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　　小鼠ELISA試劑盒說明書

　　中文名：小鼠ELISA試劑盒

　　別名：小鼠ELISA Kit

　　供貨商：上海遠慕

　　規(guī) 格：96T/48T

　　預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。

　　特點：靈敏性高、特異性強、重復性好。

　　種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

　　標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等

　　用途：僅供科研究使用!請勿用于臨床

　　洗板方法

　　1. 手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次。

　　2. 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

　　Elisa試劑盒計算

　　以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標)，OD值為橫坐標(對數(shù)坐標)，在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用業(yè)制作曲線軟件進行分析，如curve expert 1.3，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度，再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

　　操作步驟：

　　1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

　　2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

　　3、加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。

　　4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

　　5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。

　　6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

　　7、溫育：重復4的操作。

　　8、洗板：重復5的操作。

　　9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

　　10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。

　　11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

　　12、計算：根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

　　小鼠ELISA試劑盒注意事項：

　　1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

　　2. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

　　3. 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

　　5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6. 底物請避光保存。

　　7. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

　　8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

　　9. 本試劑不同批號組分不得混用。

　　小鼠ELISA試劑盒說明書生一直視質量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司