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　　本生ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中加標(biāo)回收注意事項(xiàng)

　　加標(biāo)回收確定樣品成分對利用抗體進(jìn)行的抗原檢測的影響。例如，組織培養(yǎng)物上清液中所含的多種蛋白可能會阻止抗體的結(jié)合，增加信噪比。這可能導(dǎo)致低估目標(biāo)濃度。

　　將已知濃度的蛋白質(zhì)加入到樣品基質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑中。通過該測定對加標(biāo)蛋白進(jìn)行定量分析，并對樣品基質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑的結(jié)果進(jìn)行比較。

　　如果結(jié)果相同，那么樣品基質(zhì)可視為適用于該測定程序。如果回收率不同，則樣品基質(zhì)中的組分對分析物檢測有干擾。

　　ELISA實(shí)驗(yàn)加標(biāo)回收應(yīng)注意事項(xiàng)

　　1、加標(biāo)物的形態(tài)應(yīng)和待測物的形態(tài)相同。

　　2、加標(biāo)量應(yīng)和樣品中所含待測物的測量精密度控制在相同的范圍內(nèi)，一般情況下作如下規(guī)定：

　　(1)加標(biāo)量應(yīng)盡量與樣品中待測物含量相等或相近，并應(yīng)注意對樣品容積的影響;

　　(2)當(dāng)樣品中待測物含量接近方法檢出，加標(biāo)量應(yīng)控制在校準(zhǔn)曲線的低濃度范圍;

　　(3)在任何情況下加標(biāo)量均不得大于待測物含量的3倍;

　　(4)加標(biāo)后的測定值不應(yīng)超出方法的測定上限的90%;

　　(5)當(dāng)樣品中待測物濃度高于校準(zhǔn)曲線的中間濃度時(shí)，加標(biāo)量應(yīng)控制在待測物濃度的半量。

　　3、由于加標(biāo)樣和樣品的分析條件完全相同，其中干擾物質(zhì)和不正確操作等因素所導(dǎo)致的效果相等。當(dāng)以其測定結(jié)果的減差計(jì)算回收率時(shí)，常不能確切反映樣品測定結(jié)果的實(shí)際效果。

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