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BUNSEN本生:細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)問(wèn)題解答
一、細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)問(wèn)答
1.BHK細(xì)胞就是指BHK21嗎?
答:BHK細(xì)胞是指幼年敘利亞地鼠腎細(xì)胞(Baby Hamster SyrianKidney),1961年建株。原始的細(xì)胞株是成纖維細(xì)胞,貼壁依賴(lài)性。1963年獲得單細(xì)胞克隆細(xì)胞。后經(jīng)無(wú)數(shù)次傳代后細(xì)胞可懸浮生長(zhǎng),它廣泛用于增殖各種病毒,生產(chǎn)獸用疫苗。zui常用的是BHK21的一個(gè)亞克隆細(xì)胞,即克隆13或C13。
2.二倍體細(xì)胞有什么特點(diǎn)?
答:二倍體細(xì)胞的染色體組型是2n核型;貼壁依賴(lài)接觸抑制;一般可傳代50代;無(wú)致瘤性。如W1-38:正常胚肺組織人二倍體細(xì)胞系。MRC-5:從正常男性肺組織中獲得的人二倍體細(xì)胞系。
3.什么是動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)?
答:所謂動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)(large-scaleculturetechnology)是指在人工條件下(設(shè)定pH、溫度、溶氧等),在細(xì)胞生物反應(yīng)器(bioreactor)中高密度大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。
4.細(xì)胞體內(nèi)外培養(yǎng)的差別是什么?
答:細(xì)胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境中,時(shí)間長(zhǎng)了,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無(wú)限生長(zhǎng)的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。
5.什么是無(wú)血清培養(yǎng)基?與普通培養(yǎng)基有什么區(qū)別?
答:無(wú)血清培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。添加組分可能包括纖連蛋白、層粘連蛋白等貼壁因子、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒等。
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