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BUNSEN本生開展:胎牛血清 “你問我答”活動
技術(shù)員答道:凍結(jié)血清時,請依照所主張的逐漸凍結(jié)法(-20℃至4℃至室溫),若血清凍結(jié)時改動的溫度太大,試驗顯現(xiàn)十分簡單發(fā)作沉積物。在凍結(jié)的一起,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,削減沉積的發(fā)作。 若有必要做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的準(zhǔn)則,而且隨時搖晃均勻。溫度過高,時刻過久或搖晃不均勻,都會構(gòu)成沉積物的增多。
接著,李教師問道:“我傳聞能夠不做熱滅活,趁著這個機會,我順便問一下,是不是非得做熱滅活啊?”
本生技術(shù)員答道:試驗顯現(xiàn),經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至一般由于高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而構(gòu)成細(xì)胞生長速率的下降。而經(jīng)過熱處理的血清,沉積物的構(gòu)成會顯著的增多,這些沉積物在倒置顯微鏡下調(diào)查,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃環(huán)境中,又會使此沉積物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的割裂擴增。 因而我們主張您,若非有必要,您能夠不需要做熱處理這一步。
還有一位來山東的王老師問道:“在血清的凍結(jié)這一方面可難到我了,怎樣凍結(jié)才能讓產(chǎn)品的質(zhì)量不受到影響呢?”
技術(shù)員答道:我們主張您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但有必要注意的是,融解過程中有必要規(guī)則地?fù)u晃均勻。
接著,上海的李教師問:“500ml的血清一般怎樣分裝?怎樣保存?”
本生技術(shù)員答道:保存血清的話,做好是在-5℃至-2O℃。如果是存放于4℃中,請不要超越一個月。若您一次無法用完一瓶,主張您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。規(guī)格為500ml的血清應(yīng)當(dāng)這樣分裝:
1. 預(yù)備滅菌的血清瓶
2. 慢慢凍結(jié),*后放在室溫平衡下溫度。
3. 滅活:水浴鍋,56℃,30分鐘,而且隨時搖晃均勻。取出,立即放在冰上冷卻自然冷卻至室溫。在熱滅活過程中,定時適當(dāng)搖動能夠削減沉積現(xiàn)象的發(fā)作。
4. 無菌分裝 轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺內(nèi)將血清分裝入50-100ml血清瓶中(注意預(yù)先要將血清悄悄搖動數(shù)周、混勻;用吸液管吹出血清時要注意:不要吹出氣泡封口,并于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
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