詳細(xì)內(nèi)容

微囊藻毒素(MC)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定相關(guān)液體樣本中微囊藻毒素(MC)的含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測(cè)定標(biāo)本中微囊藻毒素(MC)水平。用純化的微囊藻毒素(MC)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入微囊藻毒素(MC)，和 HRP標(biāo)記的微囊藻毒素(MC)抗原，使它們競爭結(jié)合，，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的微囊藻毒素(MC)的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中微囊藻毒素(MC)的含量。

ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個(gè)1 個(gè)
酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本處理：(1)水樣采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次，再經(jīng)玻璃纖維過濾后，備查

(2)組織

樣品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提，或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，備查

2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1.加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加 50 微升，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

2.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。

6.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色215 分鐘.

7.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

8.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

檢測(cè)范圍：

30 ng/L -850 ng/L

規(guī)格：

96 人份/盒

保存條件及有效期

1.試劑盒保存：;2-8℃。

2.有效期：6 個(gè)月
 

微囊藻毒素(MC)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

 

更新時(shí)間：2024/9/27 8:46:19

標(biāo)簽：ELISA試劑盒   微囊藻毒素   酶聯(lián)免疫分析試劑盒   

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