詳細(xì)內(nèi)容

　　細(xì)胞分離ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

　　規(guī)格：100ml 500ml

　　保質(zhì)期：6個月

　　保存條件：4℃密封

　　產(chǎn)品名稱：ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

　　ACK紅細(xì)胞裂解液(ACKLysisBuffer)

　　產(chǎn)品簡介：

　　去除紅細(xì)胞的方法有多種，BIOISCO生產(chǎn)的ACK紅細(xì)胞裂解液(RedBloodCellLysisBuffer)，也稱為ACKLysisBuffer，是一種從人、鼠或其他哺乳動物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無核紅細(xì)胞的溶液，其主要有效成分為氯化銨，ACKLysisBuffer經(jīng)過優(yōu)化配方，在裂解無核紅細(xì)胞的同時幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。

　　BUNSEN本生代理BIOISCO ACKLysisBuffer對于裂解、去除有細(xì)胞核紅細(xì)胞，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞，效果不佳，裂解類似細(xì)胞時，不建議采用。本裂解液經(jīng)過濾除菌，經(jīng)過ACKLysisBuffer處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。

　　組成：

　　產(chǎn)品名稱CS001-100mlStorage

　　ACK紅細(xì)胞裂解液(ACKLysisBuffer)100ml4℃,密封

　　說明書一份

　　儲存條件：

　　4℃,密封，六個月有效。

　　主要成分：

　　主要由NH4Cl組成，pH7.2。

　　自備材料：

　　1、胰蛋白酶，亦可采購BIOISCO的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)(CC0130)。

　　2、離心機

　　3、PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液

　　操作步驟(僅供參考)：

　　(一)組織細(xì)胞樣本的常規(guī)操作1、制備細(xì)胞懸液:新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清。2、裂解:加入3～5倍細(xì)胞沉淀體積的ACKLysisBuffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。3、離心:4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機本步驟亦可在室溫下操作。4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。5、洗滌：根據(jù)具體實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，400～500g離心2～3min，棄上清，離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。6、如有必要，重復(fù)上述步驟5一次，共洗滌1～2次。7、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

　　(二)組織細(xì)胞樣本的快速操作(無需洗滌)1、制備細(xì)胞懸液：新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清。2、裂解：加入細(xì)胞5倍細(xì)胞沉淀體積的ACKLysisBuffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。3、加入15～20ml的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻。4、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清，本步驟亦可在室溫下操作。5、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2～4各一次。6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

　　(三)血液樣本的常規(guī)操作1、取新鮮抗凝血，400～500g離心5min，離心棄上清。2、裂解:加入6～10倍細(xì)胞沉淀體積的ACKLysisBuffer，輕柔吹打混勻，裂解1～5min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。(特別提醒：對于鼠的血液，裂解1～2min已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至4～5min，并且裂解過程中輕輕搖動以促進紅細(xì)胞裂解)3、離心:4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機本步驟亦可在室溫下操作。4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。5、洗滌:根據(jù)具體實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，400～500g離心2～3min，棄上清，離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。注意：對于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作，加入10倍血液體積的ACKLysisBuffer進行第2步操作，并在4℃或室溫裂解4～15min。對于鼠的血液，裂解4～5min已經(jīng)足夠;對于人的外周血，宜延長裂解時間至10min，但通常不宜超過15min，并且裂解過程中宜適當(dāng)搖動以促進紅細(xì)胞裂解。

　　(四)血液樣本的快速操作(無需洗滌)1、新鮮抗凝血中加入10倍體積的ACKLysisBuffer，輕輕吹打混勻，裂解4～15min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。(特別提醒：對于鼠的血液，裂解4～5min已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10min，但通常不宜超過15min，并且裂解過程中宜適當(dāng)搖動以促進紅細(xì)胞裂解。2、加入20～30mlPBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻。3、400～500g離心5min，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。5、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

　　注意事項：

　　1、制備細(xì)胞懸液是應(yīng)根據(jù)具體實驗需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液。

　　2、后續(xù)試驗如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過程中應(yīng)注意無菌操作，盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。

　　3、離心步驟盡量在4℃離心機上操作。

　　4、對于常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過程，洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。

　　5、離心洗滌后，通常微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的檢測。

　　6、如果經(jīng)過ACKLysisBuffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時不必使用DEPC處理的溶液，即無需在該操作中特意去除RNase。

　　7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

　　8、本產(chǎn)品僅供科研使用，嚴(yán)禁它用。

　　細(xì)胞分離ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。

更新時間：2024/11/13 8:41:34

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