詳細內(nèi)容

　　蛋白檢測   Western Blot  NP40裂解液(帶有抑制劑)
 

　　產(chǎn)品簡介:

　　N-40裂解液INP-40Lysi Bufer)是 種比和的細胞組織烈解液，其烈解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Westemn、P和co-IP等。用NP-40裂解液烈解得到的蛋白樣品，可以使用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

　　保存條件:

　　裂解液保存于2~8°C，其他保存于-20°C，一年有效

　　操作流程:

　　1、試劑準備

　　取適當量的裂解液，在使用數(shù)分鐘內(nèi)將蛋白酶抑制劑復合物或 和磷酸酶抑制劑復合物按照1:50加入裂解液中，或者使用100mM的PMSF，并使PMSF的終濃度為1mM.

　　2、細胞組織的裂解

　　對于貼壁細胞: 去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔加入150-250工裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2后，細胞就會被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)烈解10分鐘:對于縣浮細胞: 離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔L板每L細胞加入150-250L裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞 管，然后再裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果用于ChI，初步裂解后需在水浴上繼續(xù)裂解10分鐘。對于組織樣品: 用組織剪將組織剪成碎片后，按照每20mg組織加入150-250L裂解液的比例加入裂解液并使用用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果用于ChI，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)烈解10分鐘。

　　3、蛋白樣品收集

　　充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作.

　　注意事項:

　　1、為取得佳的使用效果，可以適當分裝后-20%C保存使用，避免過多的反復凍融:2、裂解樣品的所有步驟都需在冰上或2~ 8C進行:

　　溫要提示:為了您的自身安全，使用試劑，請做好防護，如穿實驗服，帶手套等.

　　蛋白檢測   Western Blot  NP40裂解液(帶有抑制劑) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。

更新時間：2024/12/11 16:39:42

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